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FROTIS SANGUINEO
FROTIS SANGUINEO

 

OSERVACION MICROSCOPICA DEL FROTIS SANGUINEO

INTRODUCCION

La sangre esta compuesta por una parte liquida denominada plasma o suero y una parte sólida que engloba a los elementos formes como ser: Glóbulos Rojos, Glóbulos Blancos y Plaquetas.

Se debe tomar en cuenta que el extendido no debe ser ni muy grueso ni muy delgado para su correcta visualización microscópica.

OBJETIVOS

·        Reconocer y diferenciar  los diferentes constituyentes celulares.

·        Aprender a realizar un correcto extendido.

·        Describir las deferencias de los glóbulos rojos, glóbulos blancos y plaquetas en un frotis sanguíneo.

FUNDAMENTO TEORICO

LA SANGRE Y SUS COMPONENTES

La sangre es un líquido viscoso que fluye en las arterias, venas y capilares de todos los  vertebrados, este líquido es de color amarillento, pero, debido a la presencia del pigmento hemoglobínico contenido en los eritrocitos o hematíes (Glóbulos Rojos) tiene el color característico de rojo.

La sangre se divide en dos fases o elementos que son:

1.      Fase Liquida.- compuesto por el plasma sanguíneo o suero.

2.      Fase Sólida.- compuesto por elementos formes que incluye a los glóbulos rojos, glóbulos blancos y plaquetas.

Plasma sanguíneo

El plasma sangu√≠neo es una soluci√≥n acuosa de una composici√≥n compleja que contiene un 91% de agua, 8 % de prote√≠nas y algunos rastros de otros materiales que pueden ser hormonas, electrolitos, etc. Los componentes del plasma se forman en el h√≠gado (alb√ļmina¬† y fibr√≥geno), las gl√°ndulas endocrinas (hormonas) y otros en el intestino.

En esta porción liquida de la sangre se encuentran inmersos los elementos formes. Además es un líquido salado y de color amarillento divisado y es más espeso que el agua.

El plasma es una mezcla de¬† prote√≠nas, amino√°cidos, gl√ļcidos, l√≠pidos, sales, hormonas, enzimas, anticuerpos, urea, gases en disoluci√≥n y sustancias inorg√°nicas como sodio, potasio, cloruro de calcio, carbonato, bicarbonato.

Glóbulos Rojos

A los glóbulos rojos también se las conoce como eritrocitos o hematíes. Transportan oxigeno hacia las demás células del cuerpo y gracias al componente hemoglobino en su estructura, de la misma manera transporta dióxido de carbono hacia los pulmones.

Los hemat√≠es constituyen entre 4‚Äô500000¬† a 5‚Äô000000 millones por mil√≠metro c√ļbico o microlito. Tienen un di√°metro de 6¬† a 8 micras.

Estos corp√ļsculos carecen de n√ļcleos, por la cual no deben ser considerados estrictamente como c√©lulas. De hecho contienen algunas v√≠as enzim√°ticas y su citoplasma esta ocupado por un 96% por hemoglobina, prote√≠na encargada de transportar oxigeno y di√≥xido de carbono. Los eritrocitos tienen forma de disco bic√≥ncavo, deprimido en el centro.

Los glóbulos rojos se forman en la médula ósea, especialmente en los huesos largos y planos. La hematopoyesis es el proceso por la cual se lleva a cabo esta formación.

Los hematíes aproximadamente viven 120 días, luego son sistemáticamente reemplazados por nuevos hematíes creados en el proceso eritropoyesis.   

Glóbulos Blancos

Los glóbulos blancos o leucocitos forman parte de los efectores celulares del sistema inmunológico, y son células con capacidad migratoria que utilizan la sangre como vehículo para tener acceso a diferentes partes de la anatomía. Los leucocitos son los encargados de destruir los agentes infecciosos y las células infectadas, y también secretan sustancias protectoras como los anticuerpos, que combaten a las infecciones.

El conteo normal de leucocitos est√° dentro de un rango de 4.500 y 11.500 c√©lulas por mm¬≥ (o microlitro) de sangre, variable seg√ļn las condiciones fisiol√≥gicas (embarazo, estr√©s, deporte, edad, etc.) y patol√≥gicas (infecci√≥n, c√°ncer, inmuno-supresi√≥n, aplasia, etc.). El recuento porcentual de los diferentes tipos de leucocitos se conoce como "f√≥rmula leucocitaria".

Seg√ļn las caracter√≠sticas microsc√≥picas de su citoplasma (tintoriales) y su n√ļcleo (morfolog√≠a), se dividen en:

1.¬†¬†¬†¬†¬† Granulocitos o c√©lulas polimorfo-nucleares: son los neutr√≥filos, bas√≥filos y eosin√≥filos; poseen un n√ļcleo polimorfo y numerosos gr√°nulos en su citoplasma, con tinci√≥n diferencial seg√ļn los tipos celulares, y

2.¬†¬†¬†¬†¬† Agranulocitos o c√©lulas monomorfo-nucleares: son los linfocitos y los monocitos; carecen de gr√°nulos en el citoplasma y tienen un n√ļcleo redondeado.

1.      Granulocitos o células polimorfo-nucleares

a)¬†¬†¬†¬†¬† Neutr√≥filos, presentes en sangre entre 2.500 y 7.500 c√©lulas por mm¬≥. Son los m√°s numerosos, ocupando entre un 55% y un 70% de los leucocitos. Se ti√Īen p√°lidamente, de ah√≠ su nombre. Se encargan de fagocitar sustancias extra√Īas (bacterias, agentes externos, etc.) que entran en el organismo. En situaciones de infecci√≥n o inflamaci√≥n su n√ļmero aumenta en la sangre. Su n√ļcleo caracter√≠stico posee de 3 a 5 l√≥bulos separados por finas hebras de cromatina, por lo cual antes se los denominaba "polimorfo-nucleares" o simplemente "poli-nucleares", denominaci√≥n err√≥nea.

b)¬†¬†¬†¬†¬† Bas√≥filos: se cuentan de 0,1 ¬†a 1,5 c√©lulas por mm¬≥ en sangre, comprendiendo un 0,2-1,2% de los gl√≥bulos blancos. Presentan una tinci√≥n bas√≥fila, lo que los define. Segregan sustancias como la heparina, de propiedades anticoagulantes, y la histamina que contribuyen con el proceso de la inflamaci√≥n. Poseen un n√ļcleo a menudo cubierto por los gr√°nulos de secreci√≥n.

c)¬†¬†¬†¬†¬†¬† Eosin√≥filos: presentes en la sangre de 50 a 500 c√©lulas por mm¬≥ (1-4% de los leucocitos) Aumentan en enfermedades producidas por par√°sitos, en las alergias y en el asma. Su n√ļcleo, caracter√≠stico, posee dos l√≥bulos unidos por una fina hebra de cromatina, y por ello tambi√©n se las llama "c√©lulas en forma de antifaz".

2.      Agranulocitos o células monomorfo-nucleares

a)¬†¬†¬†¬†¬† Monocitos: Conteo normal entre 150 y 900 c√©lulas por mm¬≥ (2% a 8% del total de gl√≥bulos blancos). Esta cifra se eleva casi siempre por infecciones originadas por virus o par√°sitos. Tambi√©n en algunos tumores o leucemias. Son c√©lulas con n√ļcleo definido y con forma de ri√Ī√≥n. En los tejidos se diferencian hacia macr√≥fagos o histiocitos.

b)¬†¬†¬†¬†¬† Linfocitos: valor normal entre 1.300 y 4000 por mm¬≥ (24% a 32% del total de gl√≥bulos blancos). Su n√ļmero aumenta sobre todo en infecciones virales, aunque tambi√©n en enfermedades neopl√°sicas (c√°ncer) y pueden disminuir en inmunodeficiencias. Los linfocitos son los efectores espec√≠ficos del sistema inmunol√≥gico, ejerciendo la inmunidad adquirida celular y humoral. Hay dos tipos de linfocitos, los linfocitos B y los linfocitos T.

Los linfocitos B están encargados de la inmunidad humoral, esto es, la secreción de anticuerpos (sustancias que reconocen las bacterias y se unen a ellas y permiten su fagocitosis y destrucción). Los granulocitos y los monocitos pueden reconocer mejor y destruir a las bacterias cuando los anticuerpos están unidos a éstas (ozonización). Son también las células responsables de la producción de unos componentes del suero de la sangre, denominados inmunoglobulinas.

Los linfocitos T reconocen a las células infectadas por los virus y las destruyen con ayuda de los macrófagos. Estos linfocitos amplifican o suprimen la respuesta inmunológica global, regulando a los otros componentes del sistema inmunológico, y segregan gran variedad de citoquinas. Constituyen el 70% de todos los linfocitos.

Tanto los linfocitos T como los B tienen la capacidad de "recordar" una exposición previa a un antígeno específico, así cuando haya una nueva exposición a él, la acción del sistema inmunológico será más eficaz.

Plaquetas

Las plaquetas (trombocitos) son fragmentos celulares peque√Īos (2-3 őľm de di√°metro), ovales y sin n√ļcleo. Se producen en la m√©dula √≥sea a partir de la fragmentaci√≥n del citoplasma de los megacariocitos quedando libres en la circulaci√≥n sangu√≠nea. Su valor cuantitativo normal se encuentra entre 150.000 y 450.000 plaquetas por mm¬≥ (en Espa√Īa, por ejemplo, el valor medio es de 226 000 por microlitro con una desviaci√≥n est√°ndar de 46 000[2] ).

Las plaquetas sirven para taponar las lesiones que pudieran afectar a los vasos sanguíneos. En el proceso de coagulación (hemostasia), las plaquetas contribuyen a la formación de los coágulos (trombos), así son las responsables del cierre de las heridas vasculares. Ver trombosis. Una gota de sangre contiene alrededor de 250.000 plaquetas.

  

Frotis sanguíneo:

Es la  extensión de sangre realizada sobre un portaobjeto y a partir de la cual se observarán, al microscopio, las características de las células sanguíneas.

El frotis sangu√≠neo se usa para an√°lisis¬† rutinario¬† que¬† acompa√Īa¬† a¬† todo¬† hemograma,¬† ya¬† sea¬† en forma manual o automatizado.

Este  preparado  entrega  valiosa  información  en  casos  como  las  leucemias, deficiencias  de  hierro,  trastornos  genéticos  de  la  forma  de  los  eritrocitos, posibles deficiencias de vitamina B12.

Procedimiento para realizar un frotis sanguíneo

  1. Depositar la muestra en una de las extremidades del portaobjeto
  2. Con otro portaobjetos o cubreobjetos realizar un desplazamiento uniforme de la muestra, con un √°ngulo de 45¬ļ C aproximadamente.

Partes del frotis sanguíneo

Cabeza: La observación microscópica en esta sana no es recomendable ya que es una zona en donde existe demasiada aglutinación de glóbulos rojos.

Cuerpo: Zona ideal para la observación microscópica, condicionalmente es una zona en la cual los glóbulos y plaquetas no están aglutinados ni esparcidos.

Cola: Zona de observación microscópica, en la cual se observa a los glóbulos y plaquetas desparramados. Esta franja tiene un acabado en forma de barba jaspeada.

MATERIALES


·        Microscopio compuesto

·        Una lanceta estéril

·        Algodón

·        Alcohol

·        Portaobjetos

·        Cubreobjetos


PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Extracción sanguínea

1.      Masajear la yema del dedo medio o anular

2.      Limpiar la yema del dedo (se sugiere escoger el dedo de la mano menos utilizada), con algodón empapado en alcohol.

3.      Mantener presionado el dedo, realizar una punción suavemente y rápida con la lanceta estéril a un costado de la yema o pulpejo del dedo seleccionado.

4.¬†¬†¬†¬†¬† Del dedo surgir√° un corro de sangre, hacer caer una gota de sangre en un extremo del portaobjetos (para la muestra h√ļmeda, y otra gota en el medio del portaobjetos para la muestra seca).

5.      Tapar la punción realizada con un pedazo de algodón seco (no debe estar empapado en alcohol), esto para que no se produzca hemorragia.

6.¬†¬†¬†¬†¬† Colocar un cubreobjetos (o portaobjetos) perpendicularmente (√°ngulo de 45¬ļ C aproximadamente) sobre la gota de sangre y deslizarlo hacia el otro extremo del portaobjetos.

7.      Observar al Microscopio.

Observación microscópica

  1. Muestra seca

1.      Colocar un cubreobjetos encima de la muestra sanguínea del portaobjetos que contiene la muestra sanguínea en el centro.

2.      Acercar a la platina del microscopio para su posterior observación en las medidas de 4x, 10x, y 40x

  1. Muestra h√ļmeda

1.      Una vez realizada la extensión correcta se debe dejar secar la muestra por unos minutos.

2.      Luego se coloca unas gotas de alcohol (metanol para fijar), se deja actuar el alcohol de dos a cuatro minutos (el alcohol es volátil).

3.      Una vez evaporado el alcohol se aplica unas gotas del colorante y luego se deja secar por 10  a 15 minutos.

4.      Cuando la muestra este seca, se debe lavar con piseta (contiene agua destilada). Luego secar y limpiar la parte inferior del portaobjetos que contiene a la muestra.

5.      La muestra adquiere un color violeta azulado a la cual se coloca el aceite de inmersión para su posterior observación.

          

          

         

Resultado de la observación microscópica

1.¬†¬†¬†¬†¬† Con d√©bil aumento explorar la preparaci√≥n para localizar la zona en la que el frotis es m√°s perfecto. Los lugares m√°s aptos son aquellos en los que la extensi√≥n de los gl√≥bulos se ha conseguido en una sola capa, est√°n bien te√Īidos y no se han producido precipitados de los colorantes. Cuando se observe una zona apta, pasar a aumentos m√°s fuertes.

2.¬†¬†¬†¬†¬† En el campo del microscopio, se ver√°n con un dominio predominante los¬†gl√≥bulos rojos, hemat√≠es o eritrocitos, te√Īidos en color rojo. No tienen n√ļcleo y son m√°s delgados por el centro que por los bordes. Los¬†gl√≥bulos blancos o leucocitos¬†se identifican f√°cilmente por la presencia de n√ļcleo. Hay varias clases de gl√≥bulos blancos:

v¬†¬†¬†¬† Los¬†linfocitos¬†algo mayores que los gl√≥bulos rojos, con un n√ļcleo muy voluminoso que ocupa casi todo el gl√≥bulo, aparece fuertemente te√Īido en color violeta oscuro.

v¬†¬†¬†¬† Los¬†monocitos¬†son los leucocitos mayores, poco frecuentes normalmente, hay que desplazarse por la preparaci√≥n para encontrar alguno. Tienen un n√ļcleo muy grande y redondeado que aparece te√Īido en color violeta.(Es bueno que recuerdes su funci√≥n que es la de fagocitosis).

v¬†¬†¬†¬† Los¬†poli-nucleares¬†presentan el n√ļcleo como fragmentado o con aspecto arrosariado (en forma de arroz).

v¬†¬†¬†¬† Los¬†eosin√≥filos, con granulaciones abundantes de color rojizo y el n√ļcleo te√Īido de color azul marino. Estos gl√≥bulos aumentan su n√ļmero en caso de parasitosis o procesos al√©rgicos.

v¬†¬†¬†¬† Los¬†bas√≥filos¬†presentan un n√ļcleo te√Īido de rojo y las granulaciones del citoplasma de color muy oscuro.

3.¬†¬†¬†¬†¬† Las¬†plaquetas¬†aparecen como peque√Īos fragmentos te√Īidas de color violeta. Estas c√©lulas intervienen en el proceso de coagulaci√≥n sangu√≠nea.

4.¬†¬†¬†¬†¬† El n√ļmero promedio de gl√≥bulos rojos en el hombre es de 5.000.000 por mm3¬†de sangre. La cifra media de gl√≥bulos blancos es de 7.000 ¬†a 8.000 por mm3. Hay por tanto un gl√≥bulo blanco por cada 600 √≥ 700 gl√≥bulos rojos. Por lo tanto para ver todos los tipos de gl√≥bulos blancos debes buscarlos en distintos campos de la preparaci√≥n. El n√ļmero de plaquetas es de unas 250,000 por mm3

Aplicación de frotis sanguíneo.- La aplicación del frotis esta en el área del estudio de la estructurara morfológica de las células sanguíneas.

 

BIBLIOGRAFIA

·        <<<www.http://html.rincondelvago.com/extension-o-frotis-sanguineo.html>>>

·        <<<www.http://www.educa.madrid.org/portal/c/portal/layout?p_l_id=2288.152>>>

·        <<<www.http://www.juntadeandalucia.es/averroes/recursos_informaticos/concurso2001/accesit_4/frotissangre.html>>>

·        <<<www.http://www.scribd.com/doc/16034154/Frotis-Sanguineo>>>

·        <<<http://es.wikipedia.org/wiki/Sangre>>>

·        <<<www.http://www.monografias.com/trabajos/sangre/sangre.shtml>>>

·        <<<www.http://www.bsburgos.org/la_sangre.htm>>>

·        <<<www.http://www.invenia.es/oepm:e99401810>>>

·        <<<www.http://kidshealth.org/parent/en_espanol/general/blood_esp.html>>>

·        <<<www.http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003665.htm>>>

 

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